兽用B超牛活体采卵OPU应用

牛活体取卵(OPU)是继体外受精(IVF)和胚移植(ET)之后的用于牛胚胎实验操作和生产繁殖的一项非常实用的胚胎工程技术。在20世纪80年代报道在B超监视下施行0PU操作以来，这项技术已被广泛用于牛胚胎体外生产。OPU这项技术具有应用广泛、操作便利、高效和可重复性以及损伤小等优点。通过联合应用OPU和IVF这两种技术，可充分提高良种牛的繁殖潜力和大量生产高质量的胚胎。

OPU操作参照前，母牛站立保定，2mL利多卡因尾硬膜外麻醉及1 mL“846合剂II”肌注。清除直肠粪便，清洗外阴部，并用0.1%新洁尔灭消毒外阴部。将带有采卵针的探头轻缓插到阴道穹隆，操作人员通过直肠隔着直肠壁将卵巢牵引至探头端部，根据显示屏图像，调整卵巢和探头的位置，使卵巢位于穿刺引导线上，推进采卵针，同时，用脚踏开关控制真空泵抽吸卵泡液，压力在100 mmHg左右(除实验1.3.4)，用DPBS(含3%BSA和%2 U/mL肝素)冲洗采卵针和导管，冲洗液也一同放人收集管。所有≥2 mm的卵泡均被穿刺，记录穿刺卵泡的数量。

OPU为体外生产高品质牛胚胎提供了一个有价值的方法。随着牛基因组测序的完成，以及新的数量性状位点的绘制[26I，通过牛0PU回收具有清晰遗传背景的卵母细胞，将为在分子水平上研究牛胚胎发育提供宝贵的实验材料，并最终为生产优质牛胚胎产生显著的经济和实用价值。